Kształtowanie komórek obejmuje etapy wstrzykiwania, kształtowania i uzyskiwania komórek. Komórki w kolbie do hodowli komórkowej muszą rosnąć i rozwijać się do pewnego stopnia. W tym momencie należy polegać na trypsynie, aby strawić komórki na zewnętrznej ścianie kolby, a następnie ją wyczuć. W przypadku enzymów czas trawienia musi być kontrolowany.
Kolba do hodowli komórkowej T75
Trypsyna należy do innej klasy trypsyny, która może rozkładać białka na błonach komórkowych połączonych z kolbami do hodowli komórkowych. Rozpuszczając białko na odpowiedniej części, rozpuszcza się białko na styku między białkami, a komórka staje się kulista dzięki sile podtrzymującej ramy komórkowej własnej struktury wewnętrznej, oddzielając w ten sposób komórki. Poziom trawienia trypsyną jest kluczowym czynnikiem w kształtowaniu komórek: nadmierne trawienie zwiększa ilość szczątków komórek, wzrasta liczba czarnych resztek, komórki odpadną jako całość, poważnie zagrażając żywotności komórek, a niektóre komórki unoszą się wraz z odrzucanym odpływem trypsyny; jeśli trawienie nie wystarczy, komórkom trudno jest zdmuchnąć z wewnętrznej ściany butelki, a ciągłe dmuchanie i bicie również zaburzy aktywność komórek.
kolba do hodowli komórkowej
Butelka z roztworem do hodowli białek surowicy
W różnych instytucjach lub komórkach działanie enzymów trzustkowych nie jest takie samo. Aktywność rozproszonych komórek enzymu trzustkowego jest również związana z wartością jego stężenia, temperaturą i czasem trwania efektu. Gdy pH wynosi 8,{1}}, a temperatura wynosi 37, poziom skuteczności wodnego roztworu enzymu trzustkowego jest stosunkowo wysoki. Podczas stosowania trypsyny należy dobrze kontrolować stężenie, temperaturę i czas trwania, aby zapobiec uszkodzeniu komórek spowodowanemu nadmiernym trawieniem. Ponieważ Ca2, Mg2 i białka surowicy, gramy białka zmniejszają aktywność pankreatyny, dlatego przygotowując wodny roztwór pankreatyny należy stosować BSS bez Ca2, Mg2, takie jak: roztwór D-Hanksa. Podczas zatrzymywania trawienia trypsynę można zatrzymać za pomocą pożywki do hodowli komórek białka surowicy lub opóźniacza trypsyny, aby zatrzymać wpływ trypsyny na komórki.
kolba do hodowli
Kolba do hodowli komórkowej T25
Ponadto, jeśli jest to nowo zakupiona komórka, możesz użyć niższego stężenia trypsyny, aby najpierw zbadać czas trawienia i obserwować, czy komórki stają się okrągłe z każdą minutą i robić dobre wyniki. Podsumowując, podczas pozyskiwania komórek do kolby do hodowli komórkowej konieczna jest kontrola czasu trypsynizacji, tak aby skutecznie utrzymać żywotność komórek.
